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SUMMARY:Defesa – Daniele Enriquetto Mascarelli
DESCRIPTION:Defesa de Dissertação de Mestrado \nDaniele Enriquetto Mascarelli \nConstrução e caracterização de uma proteína quimérica CD4-GFP \nLocal: Auditório da FCF \nPresidente \nProf. Dr. Marcio Chaim Bajgelman — LNBio / CNPEM \nMembros titulares \nProfª Drª Elisa Maria de Sousa Russo — FCFRP/ USP \nProf. Dr. Jörg Köbarg — FCF / Unicamp \nMembros suplentes \nProfª Drª Ana Carolina Migliorini Figueira — LNBio / CNPEM \nProf. Dr. Andre Luis Berteli Ambrosio — IFSC / USP \nProfª Drª Douglas Adamoski Meira — LNBio / CNPEM \nResumo: As tecnologias de biologia molecular possibilitam a produção de proteínas recombinantes\, que são amplamente utilizadas em pesquisa e também exploradas para a produção de insumos e fármacos pela indústria. A metodologia para geração de uma proteína recombinante consiste em veicular um cassete de expressão gênica para uma célula-alvo\, que então poderá produzir a proteína de interesse. Essa produção pode ocorrer em sistemas heterólogos\, sendo que dentre os principais\, temos o cultivo em células bacterianas\, leveduras\, células de inseto e de mamíferos. Cada sistema de produção apresenta particularidades que devem ser consideradas para atender requisitos de funcionalidade\, como modificações pós-traducionais\, e também a otimização de custos envolvidos na produção. O sistema de expressão em cultura de células de inseto se baseia na construção de um vetor baculoviral\, que contém o cassete de expressão codificando a proteína de interesse. Esse vetor infecta células em cultura que passarão a produzir a proteína recombinante\, a qual poderá ser purificada. O sistema baculoviral pode ser utilizado para produção de proteínas que necessitam de modificações pós-traducionais\, com um custo inferior e maior rendimento que utilizando-se um sistema de produção em células de mamífero. Neste projeto\, descrevemos a construção e caracterização de uma proteína quimérica recombinante contendo um domínio do receptor CD4 humano fusionado à proteína repórter GFP. Essa proteína recombinante\, denominada CD4-GFP\, foi gerada por meio de um sistema baculoviral em cultura de células de inseto. Otimizamos condições downstream\, que resultaram em aumento de rendimento e possibilitaram a realização de ensaios in vitro\, demonstrando a seletividade da proteína pelo alvo molecular GP-120\, o qual é expresso na superfície de células infectadas pelo vírus da imunodeficiência humana. Essa ferramenta tem uso potencial no em estudos relacionados à biologia do vírus da imunodeficiência humana\, para o desenvolvimento de ensaios diagnósticos e pesquisa de novos fármacos antivirais que atuem na interação viral com a célula-alvo.
URL:https://fleming.fcf.unicamp.br/evento/defesa-daniele/
LOCATION:Auditório da FCF\, Rua Candido Portinari\, 200\, Campinas\, São Paulo\, 13083-871
CATEGORIES:Defesas,Mestrado,Pós-Graduação
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